上海義森生物有限公司：枯草芽孢桿菌

課題：蠟樣芽孢桿菌ATCC14579核黃素操縱子的克隆及在枯草芽孢桿菌中的表達

【作者】 王靖宇； 陳濤； 班睿； 陳洵； 趙學明；

【Author】 WANG Jing-yu,CHEN Tao,BAN Rui,CHEN Xun,ZHAO Xue-ming （Department of Bioengineering, School of Chemical Engineering and Technology, Tianjin University,Tianjin 300072,China）

【機構(gòu)】 天津大學化工學院生物工程系； 天津大學化工學院生物工程系 天津300072； 天津300072； 天津300072；

【摘要】 利用BLAST從B cereusATCC14 5 79的基因組中找到一段與核黃素操縱子具有較高相似性的4 6kb大小的基因組DNA片段 ,該片段中含有完整的核黃素操縱子。該操縱子結(jié)構(gòu)基因的編碼產(chǎn)物的氨基酸序列與核黃素操縱子相應結(jié)構(gòu)基因的編碼產(chǎn)物的氨基酸序列具有 99%的同源性。該片段被克隆到大腸桿菌 -穿梭載體pHP13M中。表達分析的結(jié)果表明B cereusATCC14 5 79核黃素操縱子可在大腸桿菌和中表達。利用PCR方法用來自枯草桿菌的sacB基因的啟動子替換B cereusATCC14 5 79核黃素操縱子原有的啟動子使其更好表達。替換啟動子后的核黃素操縱子在本文使用的發(fā)酵條件下有較好的表達 ,核黃素產(chǎn)量從 39 5mg L增加到 6 1 7mg L。  

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